Beschafft werden soll ein vollautomatisches, hochauflösendes, spektrales konfokales Laser-Scanning-Mikroskop um sensitive, hoch- und höchstauflösende räumliche Aufnahmen an lebenden und fixierten Zellkulturen durchzuführen. Es wird eine unmittelbare, zeitlich und räumlich hochauflösende in vivo Darstellung von subzellulären, u.a. schwachen fluoreszenzmarkierten Strukturen und deren dynamischer Prozesse (Transport, pH Monitoring, Phagozytose) in Bildstapeln in bis zu 1 Sek. Abständen mit einer lateralen räumlichen Auflösung bis zu 120 nm benötigt.

Einen weiteren Nutzungsbereich stellen Aufnahmen von größeren Arealen (Gehirnschnitte, Zebrafische) sowohl als Übersicht als auch mit größter Auflösung (120 nm) und hoher Eindringtiefe (150 μm) in die Probe dar. Eine hohe Scangeschwindigkeit und ein voll motorisierter Scantisch des Konfokal-Mikroskops sollen das automatisierte Scannen dieser großen Areale bei geringem Zeitbedarf im „Stitching“ Verfahren ermöglichen.

Anforderungen:

Hohe Scangeschwindigkeit und niedrige Anregungsintensität zur Minimierung des Bleichens,

Minimierung thermischer und phototoxischer Einflüsse,

Möglichkeit zur vollautomatisierten Erzeugung und Darstellung der Aufnahmen,

Scnellstmögliche Wiedergabe/Beobachtung hochaufgelöster Bildstapel,

parallele Quantifizierung stärkerer und schwächerer Fluoreszenz für Kolokalisationsstudien unterschiedlich exprimierter Proteine,

Spezifikationen:

Mikroskop,

inverses vollmotorisiertes/automatisiertes Mikroskopsystem incl. motorisierten Scantisch für Stitching,

Halterrahmen für Multiwell, Singlewell Petrischalen (Durchmesser 24-68mm) und Objektträgern (ca. 125 x 2-8 mm),

Inkubationsvorrichtung incl. Temperatur und CO2 Steuerungsmodul,

motorisierter Autofocus,

Touchscreen Steuereinheit, separat über Dockingstation platzierbar,

6-fach Objektivrevolver, motorisiert,

6-fach Reflektorrevolver, motorisiert,

Filterwürfel für DAPI, FITC/GFP; Cy3/Rhod,

Binokular,

Durchlicht DIC motorisiert für das Konfokalmikroskop,

Scankopf:

Konfokal Modul Scankopf,

High speed 8 Hz Vollformat 512x512; 7-8 Bilder/s,

„Stitching“-Verfahren, homogene hohe Scangeschwindigkeit,

Absolut lineare Bewegung des Lasers über den gesamten zu scannenden Bereich,

gleichmäßige Beleuchtung (identische Pixelbelichtungszeiten),

Hohe konfokale Auflösung, Auflösung mind. 6140 x 6140,

Navigator Orientierung im Objekt,

Feldrotation, freie Drehbahrkeit 360oC.

Laser:

Mindestens 4 Laserlinien (405 nm, 488 nm, 552/561 nm und 633/640 nm),

Hochpräzise Steuerung der Laserleistung, individuell pro Kanal,

Durchlicht DIC und Laser DIC.

Detektoren:

Mindestens 3 Detektoren (davon 2 hochauflösende GaAsP und 1 Detektor für höchst mögliche Auflösung „Superresolution“),

Großer physikalischer Dynamikumfang der Detektoren mit frei wählbarer Verstärkung (Spannung [V]),

Hohe Sensitivität auch bei reduzierter Laserintensität und parallel höchste Auflösung ~120/140 nm,

Niedriges Rauschen / hohes Signal,

Filterfreie Detektion,

Objektivausstattung,

umfangreiche Objektivausstattung 10 x-63 x Vergrößerung, Plan apochromatische Öl-/Glycerin-Wasser- Objektive. Die aufgeführten Objektive stellen eine Übersicht der gewünschten Objektive dar, leichte Abweichungen sind zulässig, sofern gleiche Untersuchungen ermöglicht werden.

10 x /~0,45 Plan apochromatisch

20 x /~0,8 Plan apochromatisch

20/25 x /~0,8 Plan apochromatisches Multi-ImmersionsObjektiv Wasser, Glyzerin und Öl.

40 x /1.10 W Plan apochromatisches Wasser-ImmersionsObjektiv Freier Arbeitsabstand: 0.65 mm.

63 x /~1.30 Plan apochromatisches Glyzerin/ Öl Immersions Objektiv

Steuerrechner / Monitor.

Folgende Angaben sind Richtwerte, gleichwertige Bauteile können ebenfalls eingesetzt werden. Kann die gewünschte Mindestanforderung des Steuerrechners nicht angeboten werden, wäre alternativ ein entsprechender Rechner für die Auswertung anzubieten.

Steuerrechner HPZ640 Windows 10 professional, Intel Core i7- /Intel 10Core Xeon E52650 V4.

RAM 64GB; DDR4-2133 RAM.

Grafikkarte mit fortschrittlicher Maxwell GPU Architektur für höchste Ansprüche bei 3D.

Visualisierung und Rechenbeschleunigung: NVIDIA Quadro M6000 24GB CUDAGPU.

(3072 Kernel)

HP Z Turbo Drive 256GB SATA SSD.

2x4TByte SATA Festplatte 7200 RPM SATA HDD

Slim SuperMulti DVD Writer.

UltraHD 31" LED Monitor (AHIPS), für hohen Farbumfang, 4096 x 2160Pixel (4K).

Software:

Vollständige Steuerung der motorisierten Hardware,

Konfocal Steuerungssoftware zur Bildaufnahme und Bildbearbeitung,

Multidimensionale Bildaufnahme / 3D Modul,

Bildbearbeitung, Rohdaten-basierende Quantifizierung und einfacher Datenexport,

High Resolution Modul Software zur konfokalen Höchstauflösung.

Live Data Mode.

„Reuse“-Funktion für einfache Übertragung der Aufnahmebedingungen.

Dye finder

Optische Farbstofftrennung.

Automatisches Kalibriertool.

Mikroskoptisch.

Installation.

Training von 4-6 x Personen für 2 Tage.

Optional: 3-jähriger Wartungsvertrag.